Техника определения группы крови по системе AB0

В этой статье речь пойдёт о методах определения группы крови по системе АВ0, а также об экспресс-методе определения резус-фактора.

Сначала поговорим о целях определения группы крови, а также об истории изучения этого вопроса. Интерес к переливанию крови зародился давно. Ещё в Древнем Египте врачи пытались перелить её раненым, больным, умирающим. В основном использовали в качестве доноров молодых животных. Считалось, что они обладают особой природной силой и к тому же не подвержены порокам, как люди. Переливание от человека человеку было чаще всего безуспешным. Причины этого гораздо позже открыл австрийский врач Карл Ландштейнер. Он определил, что у человека находятся различные антигены и антитела, образующие особую иммунную систему.

В настоящее время выделено около пятисот различных антигенов, но на практике группы крови определяют по системе АВ0.

По этой системе в состав крови входят:

  • агглютиногены А и В (антигены). Локализация – эритроциты;
  • агглютинины альфа и бета (антитела). Локализация – сыворотка.

Расположение их в крови:

  • Антиген А вместе с антителами альфа;
  • Антиген В вместе с антителами бета;
  • Только антитела альфа и бета.

Одновременно одноимённые антигены и антитела находиться не смогут, так как их встреча приводит к бурному проявлению т.н. реакции изогемагглютинации, что приведёт к гемолизу (разрушению) эритроцитов и прочим патологическим реакциям.

Техника определения группы крови состоит в применении знания этой особенности.
  • 1-я группа: отсутствуют агглютиногены, в сыворотке – агглютинины есть;
  • 2-я группа: есть А и бета;
  • 3-я группа: есть В и альфа;
  • 4-я группа: есть А, В, агглютининов нет.

Техника определения

Техника определения группы крови по системе АВ0 основана на визуальном наблюдении агглютинации.

Проводить исследование нужно при:

Спроси гематолога!

Не стесняйтесь, задавайте свои вопросы штатному гематологу прямо на сайте в комметариях. Мы обязательно ответим.Задать вопрос>>

Читайте так же:  Подробно про анализ крови на резус фактор и группу
  • средней температуре воздуха 20°С;
  • нормальной влажности;
  • хорошем освещении;
  • достаточном количестве времени на работу.
Несоблюдение этих условий приведёт к искажению результата.

На специальном планшете пишут фамилию исследуемого. Сам планшет разделяется на 3 сектора, по часовой стрелке: 1-я группа, 2-я, 3-я. Затем так поступают со вторым планшетом. На столе должны находиться: 2 комплекта стандартных гемагглютинирующих сывороток 1-й, 2-й и 3-й групп. Эти комплекты должны быть разных серий, с наклеенными этикетками, неповрежденные, без осадка, храниться в холодильнике. Каждый флакон нужно проверить. Также должна быть сыворотка 4-й группы крови. Дополнительно рядом находятся: иголка или шприц, бинты, дезинфицированная вата, этанол, предметные стекла, флакон физиологического раствора.

Сделав прокол пальца (можно брать и из вены), сначала появившуюся кровь вытирают стерильной ватой, следующие капли наносят на предметное стекло, затем на эти три сектора тарелки. Перед этим в планшеты должны быть добавлены стандартные сыворотки из двух разных комплектов. Объём добавляемой крови должен быть меньше объёма сыворотки.

Планшет с образцами немного трясут.

После этого добавляют физраствор, снова трясут, минут через пять делают вывод о группе крови в зависимости от следующих возможных результатов:

  1. Агглютинации нет нигде. Значит, образец имеет 1-ю группу.
  2. Агглютинация есть в секторах с 1-й и 3-й группой, нет — на 2-м секторе – исследуемый образец 2-й группы.
  3. Реакция есть в 1-м и 2-м секторе, но нет на 3-м. Исследуемый образец – 3-й группы.
  4. Реакция во всех трёх секторах, значит у человека 4-я группа. Но необходима дополнительная проверка со стандартной сывороткой 4-й группы. Если реакции и там нет, исследование точно.

Реакция гемагглютинации довольно характерна. Она имеет вид свернувшихся хлопьев, образовавшихся из белых комочков, быстро обесцвечивается.

Плюсы данной методики:

  • Низкая стоимость;
  • Распространённость;
  • Надежность.
Читайте так же:  Как происходит наследование групп крови у человека?

Минусы

  • Сложность;
  • Необходимость создания особых условий работы.

Определение моноклональными антителами

Для этого используют особые реагенты – цоликлоны. Они представляют собой клоны антител, полученных из клеточного гибрида, и способны вступать в реакцию с антигенами образца.

Выпускаются в виде порошка, который нужно развести в физиологическом растворе.

Техника проведения:

  1. На планшете размечают два сектора: анти-А и анти-В;
  2. На каждый сектор соответственно наносят каплю цоликлонов А и В;
  3. Рядом с каплей размещают каплю анализируемой крови;
  4. Перемешивают.

Трактовка результатов в соответствии с наступившей агглютинацией или ее отсутствием:

С Анти-А — С анти-В: Результат (группа крови)

  • нет — нет: 1-я
  • есть — нет: 2-я
  • нет — есть: 3-я
  • есть — есть: 3-я

Плюсы метода:

  • Быстрота;
  • Несложная трактовка результата;
  • Лёгкая обучаемость персонала.

Минусы:

  • Высокая стоимость.

Определение с помощью стандартных эритроцитов

Методика похожа на метод определения с помощью сывороток, но рядом на секторах наносят каплю реагентов стандартных эритроцитов – с заранее известными агглютиногенами, выделенными из донорской крови. Далее оценивают результат:

  1. Агглютинация есть со стандартными эритроцитами 2-й и 3-й групп – исследуемый образец относится к 1-й группе;
  2. Агглютинация есть со стандартными эритроцитами только 3-й группы  – исследуемый образец относится ко 2-й группе;
  3. Агглютинация есть со стандартными эритроцитами только 2-й группы – исследуемый образец относится к 3-й группе;
  4. Агглютинации нет нигде – исследуемый образец относится к 4-й группе.
Исследование проводится со стандартными эритроцитами одновременно, на одной планшетке.

Плюсы метода:

  • Надежность;
  • Изученность.

Минусы:

  • Более высокая стоимость;
  • Подходит большой оснащённой лаборатории;
  • Необходимость обучения персонала.

Техника обнаружения наличия или отсутствия резус-фактора

Помимо группы крови, специфичным признаком крови является резус-фактор (Rh). Это особый белок, расположенный на эритроцитах.

Ошибки в его определении могут привести к патологическим реакциям в организме, а именно — к резус-конфликту.

Резус можно определить экспресс-методом. Суть заключается в следующем: на планшетке обозначают два сектора. Первый для сыворотки антирезус, второй для контрольной. Сыворотка представляет собой реактив с анти-Rh антигеном 4-й группы крови, разведённым в альбумине. Контрольная не содержит резус-фактор. Наносят обе капли из этих реактивов на эти сектора, затем добавляют кровь. Объемы должны быть равным. Палочкой размешивают, добавляют немного физраствора. Результаты:

  • Агглютинация слева – кровь резус-положительна;
  • Агглютинации слева нет – кровь резус-отрицательна;
  • Агглютинация сразу в двух секторах – реакция сомнительна, необходимо перепроверить результат.
Достоверность методов достигает 100%, при условии проведения контрольных исследований и правильной организации работы.

Возможные ошибки при проведении исследований

Технические:

  • Нарушения климатического режима помещения;
  • Слишком короткое время наблюдения;
  • Слишком длинное время наблюдения;
  • Осадок выпавшего фибрина;
  • Неправильная организация работы.
Читайте так же:  Принципы похудения по группе крови

Биологические:

  • Некоторые заболевания, влияющие на физико-химический состав крови;
  • Неспецифическая агглютинация;
  • Свёртывание крови из-за выпадения фибрина;
  • Наличие подгрупп крови у донора.

Ошибки, зависящие от особенностей эритроцитов:

  • Слишком большая скорость агглютинации (из-за некоторых заболеваний – ожоговая болезнь, сепсис);
  • Необычный состав эритроцитов (обычно генетически обусловленный);
  • Неспецифическая агглютинация образца (при аутоиммунных заболеваниях, гемолитической болезни новорождённых);
  • Снижение способности агглютинировать – при лейкозе;
  • Присутствие кровяных химер – на разных эритроцитах разные антигены.

Ошибки, зависящие от сыворотки:

  • Истёкший срок годности;
  • Неправильное хранение;
  • Маленький титр (должен быть 1:32);
  • Возникновение феномена Томсена – неспецифической агглютинации. Встречается при попадании бактерий.

Ошибки, связанные с применением неполноценных стандартных эритроцитов и сывороток:

  • Нарушение технологии проведения исследования;
  • Ошибка в наклеивании этикетки и фасовки.

Другие ошибки:

  • Некомпетентный персонал;
  • Нарушения в заборе образца крови;
  • Попадание в образцы крови вирусов, бактерий;
  • Неправильное использование вспомогательных предметов – планшетов и др.

Определение группы крови показано на видео

Вывод

Определение группы крови по системе АВ0 — это один из самых частых видов исследований.

Проводится он в лабораториях обученным квалифицированным персоналом.

Накоплен большой опыт, отработаны различные методики в области анализа группы крови человека.

Поделиться:
Рекомендуем почитать
Нет комментариев

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Все поля обязательны для заполнения.

Этот сайт использует Akismet для борьбы со спамом. Узнайте как обрабатываются ваши данные комментариев.